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Methylated cytosines in CpG dinucleotides is a feature of mammalian CpG-rich DNA and is considered to be a transcriptional silencer. However, the function of 5-methylcytosine in CpG-less bacteriophage DNA or in Escherichia coli DNA has been a subject of controversy. Here, we demonstrated that some of the hypermethylated Escherichia coli DNA was digested more rapidly than unmethylated DNA by restriction enzymes, suggesting that hypermethylation in E. coli DNA is expressed. To test the activity of hypermethylated DNA, a vector carrying a hypermethylated beta-galactosidase gene was constructed in a lambda(cI857) background. When the vector was transformed into a host having methylated DNA, the hypermethylation activity was observed. The activity was found to be higher than that in unmethylated or hypomethylated DNA. Our results suggest

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